化學(xué)品哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗

中科檢測動物毒理試驗中心，提供毒理檢測，可以開展化學(xué)品哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗，報告具有CMA和CNAS資質(zhì)。

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化學(xué)品哺乳動物細(xì)胞基因突變檢測介紹

體外哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗是利用培養(yǎng)的哺乳動物細(xì)胞作指示生物的體外遺傳毒理學(xué)試驗，可用于檢測有化學(xué)物質(zhì)誘導(dǎo)的基因突變，適用的細(xì)胞系包括小鼠淋巴瘤細(xì)胞（L5178Y），中國倉鼠肺細(xì)胞（V79），中國倉鼠卵巢細(xì)胞（CHO），人類淋巴母細(xì)胞（TK6）等。這些細(xì)胞系，常用的遺傳學(xué)終點是檢測胸苷激酶（TK）圖標(biāo)，次黃嘌呤鳥嘌呤轉(zhuǎn)磷酸核糖激酶（HPRT/HGPRT）圖標(biāo)，黃嘌呤轉(zhuǎn)磷酸核糖激酶（XPRT）基因突變。TK、HPRT/HGPRT、XPRT突變試驗可以檢測不同的遺傳事件譜。
中科檢測動物毒理試驗中心，提供毒理檢測，可以開展化學(xué)品哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗，報告具有CMA和CNAS資質(zhì)。

化學(xué)品哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗細(xì)胞

本試驗有多種細(xì)胞類型可供選擇，包括L5178Y亞群CHO AS52V79或TK6細(xì)胞。用于本試驗的細(xì)胞類型對化學(xué)性致突變物應(yīng)具有明確的敏感性，高的集落形成效率以及穩(wěn)定的自發(fā)突變率，應(yīng)檢測細(xì)胞是否被支原體感染，若已被感染則不能使用。

化學(xué)品哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗原理

細(xì)胞在正常情況下，能產(chǎn)生HGPRT（次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶），在含有6-硫代鳥嘌呤（6-thioguanine,6-TG）的選擇性培養(yǎng)液中，HGPRT催化產(chǎn)生核苷-5，-單磷酸（NMP），NMP摻入DNA中致細(xì)胞死亡。在致癌和（或）致突變物作用下，某些細(xì)胞X染色體上控制HGPRT的結(jié)構(gòu)基因發(fā)生突變，不能再產(chǎn)生HGPRT，從而使突變細(xì)胞對6-TG具有抗性作用，能夠在含有6-TG的選擇性培養(yǎng)液中存活生長。在有或無代謝活化系統(tǒng)的條件下，將細(xì)胞培養(yǎng)物暴露于受試物中適當(dāng)時間，然后將細(xì)胞再傳代培養(yǎng)，在含有6-TG的選擇性培養(yǎng)液中，突變細(xì)胞會繼續(xù)分裂并形成集落，計數(shù)突變集落形成數(shù)，計算突變頻率，從而推斷受試物的致突變性。

化學(xué)品哺乳動物細(xì)胞基因突變檢測標(biāo)準(zhǔn)

GB/T 21793-2008 化學(xué)品體外哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗方法
GBZ/T 240.10-2011 化學(xué)品毒理學(xué)評價程序和試驗方法第10部分:體外哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗
GB/T 15670.20-2017 農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗方法第20部分:體外哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗